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小鼠腎腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)

更新更新時(shí)間:2025-02-18 瀏覽次數(shù):711

  小鼠腎腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)概述如下:
  在培養(yǎng)小鼠腎腺癌細(xì)胞時(shí),首先需要準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,通常使用的是DMEM(高糖)培養(yǎng)基,并添加10%的胎牛血清(FBS)以及必要的抗生素,如青霉素和鏈霉素(P/S),以防止細(xì)菌污染。細(xì)胞應(yīng)在含有95%空氣和5%二氧化碳的培養(yǎng)箱中,于37℃恒溫條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
  收到細(xì)胞后,應(yīng)首先檢查細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否破損,培養(yǎng)液是否有漏出或渾濁現(xiàn)象。確認(rèn)無(wú)誤后,用75%的酒精對(duì)培養(yǎng)瓶表面進(jìn)行消毒,然后將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中靜置24小時(shí),使細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定。在顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%90%時(shí),即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
  傳代時(shí),應(yīng)先棄去舊的培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS溶液潤(rùn)洗細(xì)胞12次。然后加入適量的胰酶消化液,置于培養(yǎng)箱中消化12分鐘,待細(xì)胞大部分變圓并脫落后,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。將細(xì)胞懸液離心后,棄去上清液,用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并按適當(dāng)?shù)谋壤值叫碌呐囵B(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
  在培養(yǎng)過(guò)程中,需要注意定期更換培養(yǎng)基,通常建議每周更換2~3次。同時(shí),應(yīng)定期觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),記錄細(xì)胞形態(tài)、密度等信息。當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至一定數(shù)量時(shí),可考慮進(jìn)行凍存,以便后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
  總之,小鼠腎腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作、適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件和定期的觀察記錄,以確保細(xì)胞的健康生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。

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