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小鼠腎腺癌細胞的培養(yǎng)方法及注意事項

更新更新時間:2025-02-18 瀏覽次數:739

  小鼠腎腺癌細胞的培養(yǎng)方法及注意事項概述如下:
  在培養(yǎng)小鼠腎腺癌細胞時,首先需要準備適當的培養(yǎng)基,通常使用的是DMEM(高糖)培養(yǎng)基,并添加10%的胎牛血清(FBS)以及必要的抗生素,如青霉素和鏈霉素(P/S),以防止細菌污染。細胞應在含有95%空氣和5%二氧化碳的培養(yǎng)箱中,于37℃恒溫條件下進行培養(yǎng)。
  收到細胞后,應首先檢查細胞培養(yǎng)瓶是否破損,培養(yǎng)液是否有漏出或渾濁現象。確認無誤后,用75%的酒精對培養(yǎng)瓶表面進行消毒,然后將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中靜置24小時,使細胞狀態(tài)穩(wěn)定。在顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài),當細胞密度達到80%90%時,即可進行傳代培養(yǎng)。
  傳代時,應先棄去舊的培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS溶液潤洗細胞12次。然后加入適量的胰酶消化液,置于培養(yǎng)箱中消化12分鐘,待細胞大部分變圓并脫落后,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。將細胞懸液離心后,棄去上清液,用新的培養(yǎng)基重懸細胞,并按適當的比例分到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
  在培養(yǎng)過程中,需要注意定期更換培養(yǎng)基,通常建議每周更換2~3次。同時,應定期觀察細胞生長狀態(tài),記錄細胞形態(tài)、密度等信息。當細胞生長至一定數量時,可考慮進行凍存,以便后續(xù)實驗使用。
  總之,小鼠腎腺癌細胞的培養(yǎng)需要嚴格的無菌操作、適當的培養(yǎng)條件和定期的觀察記錄,以確保細胞的健康生長和實驗的順利進行。

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